El inicio de la historia del Barcelona Sporting Club se remonta al 1 de mayo de 1925, por un grupo de jóvenes ecuatorianos, conocidos como "La Gallada de la Modelo", con la ayuda de los españoles, el hecho se dio en la casa del catalán Eutimio Pérez ubicada en la intersección de las calles Concordia e Independencia (actualmente, Eloy Alfaro y Francisco de Marcos) y se eligió al ecuatoriano Carlos García Ríos como el primer presidente de la joven institución, y también se designó al catalán Onofre Castells como presidente honorario. El club fue afiliado a la Federación Deportiva del Guayas el 1 de junio 1925, participando en el Campeonato de Amateur del Guayas.Fue justamente en agradecimiento al apoyo brindado por la comunidad española en Guayaquil, que le fue puesto su nombre: Barcelona.
Los colores iniciales del Barcelona fueron: camiseta negra con vivos blancos, pantalones blancos y medias negra.

El equipo ganó el ascenso a primera división el mismo año de su fundación. en 1927 se hizo el cambio de colores del uniforme: camiseta amarilla y roja a rayas verticales, pantalón y medias rojas.
Durante algunos años el club participó en béisbol, boxeo, atletismo y ciclismo, obteniendo varios títulos, pero en fútbol recién logró su primer campeonato de primera división en 1960, último año del amateurismo. En esa época su uniforme era de camisa amarilla con vivos rojos, pantalón y medias negras, que con ciertas variantes se mantiene hasta ahora.